ОЦЕНКА ВОЗМОЖНОСТЕЙ СНИЖЕНИЯ ТОКСИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ АНТИГЛАУКОМНОГО ГИПОТЕНЗИВНОГО ПРЕПАРАТА, СОДЕРЖАЩЕГО КОНСЕРВАНТ БЕНЗАЛКОНИЯ ХЛОРИД, НА ПЕРВИЧНУЮ КУЛЬТУРУ КЛЕТОК ЛИМБА РОГОВИЦЫ С ПОМОЩЬЮ СЛЕЗОЗАМЕНИТЕЛЯ СТИЛЛАВИТR (ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ)

Полный текст:


Аннотация

ЦЕЛЬ. Оценка цитотоксичности антиглаукомного гипотензивного препарата, содержащего в составе бензалкония хлорид, и протекторного действия слезозаменителя СтиллавитR на культуре клеток лимба роговицы.

 МЕТОДЫ. Тестируемые образцы: латанопрост 0,005%, в качестве консерванта используется бензалкония хлорид 0,02% (БХ); СтиллавитR (натрия гиалуронат 0,16%, хондроитина сульфат натрия 0,05%, D-пантенол 1%, консервант — тетраборат натрия 0,05%). Была использована первичная культура клеток лимба роговицы. На первом этапе исследования оценивали эффект воздействия на клеточную культуру препаратов в 100% концентрации: латанопрост+БХ; и с одновременным добавлением в культуру Стиллавита. На втором этапе был проведен анализ влияния последовательных разведений препаратов на показатели цитотоксичности. Задачей третьего этапа была оценка уровня жизнеспособности клеток после экспозиции их с разведенными веществами в различной комбинации: латанопрост+БХ (воздействие в течение 30 минут); последовательное добавление в культуру Стиллавита и затем через 30 минут добавление препарата (латанопрост+БХ); одновременное добавление в культуру Стиллавита и препарата (латанопрост+БХ). Для оценки жизнеспособности клеток в культуре был проведен МТС-тест с использованием набора CellTiter 96R AQueous One Solution Reagent («Promega»). Дополнительно проводилось цитологическое исследование полученных результатов.

РЕЗУЛЬТАТЫ. Уровень жизнеспособности клеток при внесении препарата (латанопрост+БХ) в 100% концентрации составляет 13,95Ѓ}4,014%. При внесении исследуемого антиглаукомного препарата совместно со Стиллавитом уровень жизнеспособности достигает 22,03Ѓ}3,152%. В результате второй серии экспериментов было установлено, что выживаемость клеток на уровне 60-80% наблюдается при разведении препарата (латанопрост+БХ) в образце в 32 раза, а в отношении препарата к объему составляет 6,25%. На третьем этапе оценивали уровень жизнеспособности клеток при внесении к ним препаратов в разведении 6,25%. Уровень выживаемости клеток при воздействии препарата латанопрост+БХ составил 68,49Ѓ}20,61%. Было установлено, что как предварительное за 30 минут до внесения препарата (латанопрост+БХ), так и одновременное добавление Стиллавита увеличивает показатели выживаемости клеточной культуры — 94,95Ѓ}12,52 и 103,8Ѓ}12,45% соответственно. Наблюдаемые различия статистически значимы при уровне надежности 95%.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ. По результатам проведенных исследований in vitro были доказаны цитопротекторные свойства слезозаменителя Стиллавит в комбинации с препаратом, содержащим латанопрост+БХ, как при их 100%, так и 6,25% концентрации, что было подтверждено с помощью цитологического исследования.


Об авторах

Г. Б. Егорова
ФГБНУ «НИИ глазных болезней»
Россия

Доктор медицинских наук, главный научный сотрудник отдела рефракционных нарушений

Москва, 119021, ул. Россолимо, 11А, Б



В. П. Еричев
ФГБНУ «НИИ глазных болезней»
Россия

Доктор медицинских наук, профессор, заместитель директора по инновационной деятельности

Москва, 119021, ул. Россолимо, 11А, Б



А. М. Суббот
ФГБНУ «НИИ глазных болезней»
Россия

Кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник лаборатории фундаментальных исследований в офтальмологии

Москва, 119021, ул. Россолимо, 11А, Б



А. А. Федоров
ФГБНУ «НИИ глазных болезней»
Россия

Кандидат медицинских наук, заведующий лабораторией фундаментальных исследований в офтальмологии

Москва, 119021, ул. Россолимо, 11А, Б



Т. В. Нестерова
ФГБНУ «НИИ глазных болезней»
Россия

Лаборант-исследователь лаборатории фундаментальных исследований в офтальмологии

Москва, 119021, ул. Россолимо, 11А, Б



А. Н. Габашвили
ФГБНУ «НИИ глазных болезней»
Россия

Научный сотрудник лаборатории фундаментальных исследований в офтальмологии

Москва, 119021, ул. Россолимо, 11А, Б



В. В. Аверич
ФГБНУ «НИИ глазных болезней»
Россия

Аверич Вероника Валерьевна, младший научный сотрудник отдела рефракционных нарушений

Москва, 119021, ул. Россолимо, 11А, Б




Список литературы

1. Еричев В.П., Амбарцумян К.Г. Консерванты и вторичный синдром ≪сухого глаза≫ при длительной местной медикаментозной терапии первичной открытоугольной глаукомы. Глаукома 2011; 2:59-66. [Erichev V.P., Ambartsumyan K.H. The preservatives and secondary dry eye syndrome in long-term topical open-angle glaucoma therapy. Glaucoma 2011; 2:59-66. (In Russ.)].

2. Еременко А.И., Янченко С.В. Классификация факторов риска при вторичном сухом глазе. Фундаментальные исследования 2006; 7:34. [Eremenko A.I., Yanchenko S.V. Classification of risk factors in secondary dry eye. Fundamental research 2006; 7:34. (In Russ.)].

3. Федоров А.А. Морфологические основы научных исследований в офтальмологии. Вестник офтальмологии 2013; 129(5):10-21 [Fedorov A.A. Morphological bases of scientific researches in ophthalmology. Vestn oftalmol 2013; 129(5):10-21. (In Russ.)].

4. Ammar D.A., Noecker R.J., Kahook M.Y. Effects of benzalkonium chloride-and polyquad-preserved combination glaucoma medications on cultured human ocular surface cells. Advances in therapy 2011; 28(6):501-510. https://doi.org/10.1007/s12325-011-0029-x

5. Khoh-Reiter S., Jessen B.A. Evaluation of the cytotoxic effects of ophthalmic solutions containing benzalkonium chloride on corneal epithelium using an organotypic 3-D model. BMC ophthalmology 2009; 9(1):5. https://doi.org/10.1186/1471-2415-9-5

6. Rolando M. et al. The effect of different benzalkonium chloride concentrations on human normal ocular surface: a controlled prospective impression cytology study. The Lacrimal System. Amsterdam: Kagler&Ghedini; 1991:89-91.

7. Rasmussen C.A., Kaufman P.L., Kiland J.A. Benzalkonium chloride and glaucoma. J Ocular Pharmacol Ther 2014; 30(2-3):163-169. https://doi.org/10.1089/jop.2013.0174

8. Yanochko G.M. et al. Comparison of preservative-induced toxicity on monolayer and stratified Chang conjunctival cells. Toxicology in Vitro 2010; 24(4):1324-1331. https://doi.org/10.1016/j.tiv.2010.02.001


Дополнительные файлы

Для цитирования: Егорова Г.Б., Еричев В.П., Суббот А.М., Федоров А.А., Нестерова Т.В., Габашвили А.Н., Аверич В.В. ОЦЕНКА ВОЗМОЖНОСТЕЙ СНИЖЕНИЯ ТОКСИЧЕСКОГО ДЕЙСТВИЯ АНТИГЛАУКОМНОГО ГИПОТЕНЗИВНОГО ПРЕПАРАТА, СОДЕРЖАЩЕГО КОНСЕРВАНТ БЕНЗАЛКОНИЯ ХЛОРИД, НА ПЕРВИЧНУЮ КУЛЬТУРУ КЛЕТОК ЛИМБА РОГОВИЦЫ С ПОМОЩЬЮ СЛЕЗОЗАМЕНИТЕЛЯ СТИЛЛАВИТR (ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ). Национальный журнал глаукома. 2017;16(4):31-36.

For citation: Egorova G.В., Erichev V.P., Subbot A.M., Fedorov A.A., Nesterova T.V., Gabashvili A.N., Averich V.V. EVALUATION OF STILLAVITR ARTIFICIAL TEARS POTENTIAL IN REDUCING THE TOXIC EFFECT OF BENZALKONIUM CHLORIDE-CONTAINING HYPOTENSIVE INSTILLATIONS ON PRIMARY CELL CULTURE OF THE CORNEAL LIMBUS (EXPERIMENTAL STUDY). National Journal glaucoma. 2017;16(4):31-36. (In Russ.)

Просмотров: 107

Обратные ссылки

  • Обратные ссылки не определены.


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 2078-4104 (Print)
ISSN 2311-6862 (Online)